• Articles
• admin

Key Difference – Paper vs Thin Layer vs Column Chromatography

papirkromatografi, thin layer chromatography, og column chromatography er tre typer kromatografiske teknikker. Hovedforskjellen mellom papirkromatografi, tynnsjiktskromatografi og kolonnekromatografi er basert på typen stasjonær fase som brukes i kromatografiteknikken. Papirkromatografi bruker et cellulosepapir som sin stasjonære fase, Tynnlagskromatografi bruker alumina eller silikagel som sin stasjonære fase, mens Kolonnekromatografi bruker en kolonne pakket med et egnet matriksmateriale som sin stasjonære fase.

i prosessen med separasjon og identifisering av biomolekyler som proteiner og karbohydrater, er kromatografi en viktig biofysisk teknikk som brukes. Kromatografi separerer forbindelser basert på deres oppløselighet, størrelse og ladning. Basert på separasjonsmekanismen bruker kromatografi mekanismer som ionbytter, absorpsjon, partisjon og størrelsesekskludering, og det er tre kromatografiske teknikker; nemlig papir, tynt lag og kolonnekromatografi. Papirkromatografi er basert på fast-flytende adsorpsjon og oppløselighet av forbindelsen, og den bruker et cellulosepapir som den stasjonære fasen. Tynnsjiktskromatografi er basert på fast-flytende adsorpsjon av molekyler. Den har en stasjonær fase som vanligvis er laget av alumina eller silikagel og mobilfasen som er løsningsmidlet. Kolonnekromatografi bruker en kolonne pakket med en matrise som brukes til å skille molekyler hovedsakelig basert på deres størrelse, affinitet eller ladning.

INNHOLD

1. Oversikt Over Kromatografi og Nøkkelforskjell
2. Hva Er Papirkromatografi
3. Hva Er Tynnsjiktskromatografi
4. Hva Er Kolonnekromatografi
5. Likheter Mellom Papir, Tynt Lag og Kolonnekromatografi
6. Side Ved Side Sammenligning-Papir vs Tynt Lag vs Kolonnekromatografi i Tabellform
7. Sammendrag

Hva Er Papirkromatografi?

Papirkromatografi Er den enkleste typen kromatografi som brukes, og Den brukes ikke til omfattende forskning. Det brukes hovedsakelig i studentlaboratorier for å identifisere biomolekyler som aminosyrer og karbohydrater tilstede i blandinger. Papirkromatografi bruker en stasjonær fase som er laget med cellulosepapir eller Whatman-filterpapir og en mobil fase som vanligvis fremstilles ved hjelp av organiske løsningsmidler som n-butanol, etc. Den stasjonære fasen er mettet med vann, noe som gjør den stasjonære fasen væske. Således, når forbindelsene blir oppdaget og tillatt å løpe i nærvær av mobilfasen, avhengig av oppløseligheten av forbindelsene, separeres de. Således, ved utvikling av kromatogrammet, kan farging gjøres for å bestemme løp lengden av hver forbindelse. Retensjonsfaktoren kan dermed beregnes.

Papirkromatografi kan videre klassifiseres som stigende papirkromatografi og synkende papirkromatografi avhengig av retningen til løsningsmidlet.

Hva Er Tynnsjiktskromatografi?

Tynnsjiktskromatografi ELLER TLC er en vanlig teknikk for å identifisere forskjellige aminosyrer som er tilstede i en blanding eller for identifisering av proteiner. Separasjonsteknikken er basert på fast-flytende adsorpsjon. Under tynnsjiktskromatografi brukes en plate laget av alumina eller silikagel som stasjonær fase. Løsemiddelblandingen varierer etter behov og kan bruke forskjellige kombinasjoner av organiske forbindelser som n-butanol, eddiksyre og vann for å forberede løsningsmidlet. Forbindelsene som skal separeres, blir oppdaget på platen og nedsenket i løsningsmiddelblandingen. Når løsningsmidlet reiser opp basert på kapillærvirkningen gitt av platen, beveger forbindelsene som er oppdaget på platen, også avhengig av deres oppløselighet i løsningsmidlet.

påvisning av flekkene etter kromatogrammet utføres ved forskjellige fargeprosedyrer. Noen bruker ninhydrinfarging som er ganske giftig for farging. Moderne tynne lag kromatogrammer bruke fluorescens teknikker for å vise kromatogram etter kjøringen. Avhengig av avstandene den har reist, kan retensjonstiden for hver forbindelse beregnes. Dette kan brukes til å identifisere typen sammensatt separert basert på blandingen som brukes. TLC brukes hovedsakelig til å identifisere aminosyrer i en proteinblanding og også å skille forskjellige typer monosakkarider tilstede i en blanding.

Hva Er Kolonnekromatografi?

Kolonnekromatografi Er et vidt begrep som brukes for å beskrive mange typer kromatografiteknikker som bruker den kolonnebaserte separasjonsmetoden. I kolonnekromatografi brukes en fysisk kolonne med et pakkemateriale for å skille forbindelsene. Separasjonen kan være basert på forskjellige fysiske egenskaper utstilt av forbindelsene. Disse egenskapene kan være kostnad, størrelse, 3d konformasjon og bindende kapasitet, etc. Således virker kolonnen pakket med matriksmaterialet som den stasjonære fasen, og vaskebufferen påført kolonnen fungerer som mobilfasen.

hvis molekylene separeres basert på størrelsen, pakkes pakkematerialet på en måte som etterlater porene for forbindelsene å reise gjennom. Dermed blir de større molekylene som ikke kan strømme gjennom porene eluert først, mens de mindre molekylene tar mye lengre tid å eluere.

hvis molekylene separeres basert på deres ladning, vil den stasjonære fasen inneholde enten en anion-eller kationveksler som forbindelsene vil bli tiltrukket av basert på deres ladning. Således under vasketrinnet vil de ikke-bundne forbindelsene elueres. Ved tilsetning av elueringsbufferen vil de bundet ladede forbindelsene elueres. Påvisningen av disse eluentene er for det meste basert på spektrofotometriske teknikker.

Hva Er Likhetene Mellom Papirtynne Lag og Kolonnekromatografi?

• Alle Papir Tynt Lag Og Kolonne Kromatografi tre teknikker brukes for separasjon av biomolekyler som aminosyrer, proteiner og karbohydrater.
• Papirtynne Lag Og Kolonnekromatografiteknikker har en mobil fase og en stasjonær fase.
• Papir Tynt Lag Og Kolonne Kromatografi teknikker bruke biofysiske mekanismer for separasjon.

Hva Er Forskjellen Mellom Papirtynne Lag og Kolonnekromatografi?

Papir vs Tynt Lag vs Kolonnekromatografi
Papirkromatografi	Papirkromatografi er en kromatografisk teknikk som brukes til å skille forbindelser basert på væske-væske adsorpsjon og oppløselighet av forbindelsen. Den bruker et cellulosepapir som sin stasjonære fase.
Tynnsjiktskromatografi	Tynnsjiktskromatografi er en annen kromatografisk teknikk basert på fast-flytende adsorpsjon av molekyler. Den har en stasjonær fase laget av alumina eller silikagel og et løsningsmiddel som mobilfasen, som er løsningsmidlet.
Kolonnekromatografi	Kolonnekromatografi bruker en kolonne pakket med en matrise som brukes til å skille molekyler hovedsakelig basert på deres størrelse, affinitet eller ladning.
Stasjonær Fase
Papirkromatografi	Papir laget av nitrocellulose Av Whatman brukes som stasjonær fase i papirkromatografi.
Tynnsjiktskromatografi	Alumina eller Silikagel brukes som den stasjonære fasen av tynnsjiktskromatografi.
Kolonnekromatografi	en kolonne pakket med egnet emballasjemateriale brukes som stasjonær fase i kolonnekromatografi.
Mobil Fase
Papirkromatografi	Løpende løsemiddel Er den mobile fasen av papirkromatografien.
Tynnsjiktskromatografi	Løsemiddel Er den mobile fasen av tynnsjiktskromatografi.
Kolonnekromatografi	Vaskebuffer er den mobile fasen av kolonnekromatografi.
Mekanismer Som Brukes Til Separasjon
Papirkromatografi	Papirkromatografi er basert på absorpsjon av fast væske.
Tynnsjiktskromatografi	Tynnsjiktskromatografi er basert på faststoff-væskeabsorpsjon.
Kolonnekromatografi	Kolonnekromatografi er basert på størrelsesekskludering, ladning og form.
Elution Buffer
Papirkromatografi	kreves Ikke av papirkromatografi.
Tynnsjiktskromatografi	ikke nødvendig for tynnsjiktskromatografi.
Kolonnekromatografi	Kreves i kolonnekromatografi.
Deteksjon
Papirkromatografi	Farging og ved å bestemme Retensjonsfaktoren.
Tynt Lag Kromatografi	Farging og ved å bestemme Retensjonsfaktoren.
Kolonnekromatografi	Spektrofotometrisk bestemmelse.

Sammendrag-Paper Thin Layer vs Column Chromatography

papirkromatografi, TLC og column chromatography er separasjonsteknikker som brukes til å skille biomolekyler som proteiner, aminosyrer Og karbohydrater (hovedsakelig monosakkarider). Papirkromatografi bruker et cellulosepapir som den stasjonære fasen, og separasjonsmekanismen er basert på fast-flytende adsorpsjon. TLC bruker også fast-flytende adsorpsjonsmekanismer. Molekylene separeres på den stasjonære fasen, avhengig av deres oppløselighet i mobilfasen. Kolonnekromatografi bruker fysiske egenskaper som størrelse, form, ladning og molekylvekt av forbindelsen for å skille. Kolonnen pakket med matriksmaterialet fungerer som den stasjonære fasen, mens vaskebufferen fungerer som løsningsmiddelfasen. Dette er forskjellen mellom et papirtynt lag og kolonnekromatografi.

Referanse:

1.Clark, Jim. «TYNT LAG KROMATOGRAFI.»Tynne Lag Kromatografi, 2007. Tilgjengelig her
2.Coskun, Ozlem. «Separasjonsteknikker: Kromatografi.»Nordlige Klinikker I Istanbul, Kare Publishing, 2016. Tilgjengelig her

Bilde Gjengitt:

1.’Kromatografi tank ‘(CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2.’Tlc-sekvens’ Av Quantockgoblin, (Offentlig Domene) via Commons Wikimedia
3.’Kolonnekromatografi’ (Public Domain) via Commons Wikimedia