• Articles
• admin

kluczowa różnica – Papier vs cienka warstwa vs chromatografia Kolumnowa

chromatografia papierowa, chromatografia cienkowarstwowa i chromatografia kolumnowa to trzy rodzaje technik chromatograficznych. Zasadnicza różnica między chromatografią papierową, chromatografią cienkowarstwową i chromatografią kolumnową opiera się na typie fazy stacjonarnej stosowanej w technice chromatografii. Chromatografia papierowa wykorzystuje papier celulozowy jako fazę stacjonarną, chromatografia cienkowarstwowa wykorzystuje tlenek glinu lub żel krzemionkowy jako fazę stacjonarną, podczas gdy chromatografia Kolumnowa wykorzystuje kolumnę wypełnioną odpowiednim materiałem matrycowym jako fazę stacjonarną.

w procesie separacji i identyfikacji biomolekuł, takich jak białka i węglowodany, chromatografia jest ważną techniką biofizyczną stosowaną. Chromatografia oddziela związki na podstawie ich rozpuszczalności, wielkości i ładunku. W oparciu o mechanizm separacji, chromatografia wykorzystuje mechanizmy takie jak wymiana jonowa, absorpcja, podział i wykluczenie wielkości i istnieją trzy techniki chromatograficzne; mianowicie, papier, cienka warstwa i chromatografia kolumnowa. Chromatografia papierowa opiera się na adsorpcji ciało stałe-ciecz i rozpuszczalności związku i wykorzystuje papier celulozowy jako fazę stacjonarną. Chromatografia cienkowarstwowa opiera się na adsorpcji cząsteczek w stanie stałym i ciekłym. Ma fazę stacjonarną, która jest zwykle wykonana z tlenku glinu lub żelu krzemionkowego i fazę ruchomą, która jest rozpuszczalnikiem. Chromatografia kolumnowa wykorzystuje kolumnę zapakowaną w matrycę, która służy do oddzielania cząsteczek głównie na podstawie ich wielkości, powinowactwa lub ładunku.

spis treści

1. Przegląd chromatografii i różnicy klucza
2. Co To jest chromatografia papierowa
3. Co to jest chromatografia cienkowarstwowa
4. Co To jest chromatografia Kolumnowa
5. Podobieństwa między chromatografią papierową, cienkowarstwową i Kolumnową
6. Porównanie Side by Side – Papier vs cienkowarstwowa chromatografia Kolumnowa w formie tabelarycznej
7. Podsumowanie

co to jest chromatografia papierowa?

chromatografia papierowa jest najprostszym rodzajem stosowanej chromatografii i nie jest używana do szeroko zakrojonych badań. Stosuje się go głównie w laboratoriach studenckich do identyfikacji biomolekuł, takich jak aminokwasy i węglowodany obecne w mieszaninach. Chromatografia papierowa wykorzystuje fazę stacjonarną, która jest wytwarzana przy użyciu papieru celulozowego lub papieru filtracyjnego Whatman oraz fazę ruchomą, która jest zwykle przygotowywana przy użyciu rozpuszczalników organicznych, takich jak n-butanol itp. Faza stacjonarna jest nasycona wodą, dzięki czemu Faza stacjonarna jest cieczą. Tak więc, gdy związki są zauważone i pozostawione do pracy w obecności fazy mobilnej, w zależności od rozpuszczalności związków, są one oddzielane. Tak więc, po opracowaniu chromatogramu, barwienie może być wykonane w celu określenia przebiegu długości każdego związku. W ten sposób można obliczyć współczynnik retencji.

chromatografia papierowa może być dalej klasyfikowana jako chromatografia wstępująca i chromatografia zstępująca w zależności od kierunku działania rozpuszczalnika.

czym jest chromatografia cienkowarstwowa?

chromatografia cienkowarstwowa lub TLC jest powszechnie stosowaną techniką do identyfikacji różnych aminokwasów obecnych w mieszaninie lub do identyfikacji białek. Technika separacji opiera się na adsorpcji ciało stałe-ciecz. Podczas chromatografii cienkowarstwowej jako fazę stacjonarną stosuje się płytkę wykonaną z tlenku glinu lub żelu krzemionkowego. Mieszanina rozpuszczalników zmienia się w zależności od wymagań i może wykorzystywać różne kombinacje związków organicznych, takich jak n-butanol, kwas octowy i woda do przygotowania rozpuszczalnika. Związki, które mają być rozdzielone, są nakrapiane na płytce i zanurzane w mieszaninie rozpuszczalników. Gdy rozpuszczalnik przemieszcza się w górę w oparciu o działanie kapilarne podane przez płytkę, związki zauważone na płytce również porusza się w zależności od ich rozpuszczalności w rozpuszczalniku.

wykrywanie plam po chromatogramie odbywa się za pomocą różnych procedur barwienia. Niektórzy używają barwienia ninhydryny, które jest dość toksyczną metodą barwienia. Nowoczesne chromatogramy cienkowarstwowe wykorzystują techniki fluorescencji do oglądania chromatogramu po uruchomieniu. W zależności od przebytych odległości można obliczyć czas retencji każdego związku. Można to wykorzystać do określenia rodzaju związku oddzielonego w oparciu o zastosowaną mieszaninę. TLC stosuje się głównie do identyfikacji aminokwasów w mieszaninie białkowej, a także do oddzielania różnych typów monosacharydów obecnych w mieszaninie.

co to jest chromatografia Kolumnowa?

chromatografia Kolumnowa jest szerokim terminem używanym do opisania wielu rodzajów technik chromatograficznych, które wykorzystują metodę rozdzielania opartą na kolumnie. W chromatografii kolumnowej używa się kolumny fizycznej z materiałem opakowaniowym w celu oddzielenia związków. Separacja może być oparta na różnych właściwościach fizycznych wykazywanych przez związki. Te właściwości mogą być ładunek, rozmiar, konformacja 3D i zdolność wiązania itp. Tak więc kolumna wypełniona materiałem matrycowym działa jak Faza stacjonarna, a bufor myjący zastosowany do kolumny działa jak Faza ruchoma.

jeśli cząsteczki są rozdzielane na podstawie wielkości, materiał opakowaniowy jest pakowany w taki sposób, że pozostawia pory dla związków, przez które mogą podróżować. Tak więc większe cząsteczki, które nie mogą przepływać przez pory, są eluowane jako pierwsze, podczas gdy mniejsze cząsteczki potrzebują znacznie więcej czasu na elucję.

jeśli cząsteczki są rozdzielane na podstawie ich ładunku, Faza stacjonarna będzie zawierać wymiennik anionowy lub kationowy, do którego związki będą przyciągane na podstawie ich ładunku. Tak więc podczas etapu mycia związki niezwiązane będą eluowane. Po dodaniu buforu elucyjnego związane naładowane związki będą eluowane. Wykrywanie tych eluentów opiera się głównie na technikach spektrofotometrycznych.

jakie są podobieństwa między cienką warstwą papieru a chromatografią Kolumnową?

• wszystkie cienkie warstwy papieru i chromatografia Kolumnowa trzy techniki są używane do oddzielania biomolekuł, takich jak aminokwasy, białka i węglowodany.
• techniki cienkowarstwowej i chromatografii kolumnowej mają fazę ruchomą i fazę stacjonarną.
• techniki cienkowarstwowej i chromatografii kolumnowej wykorzystują biofizyczne mechanizmy separacji.

Jaka jest różnica między cienką warstwą papieru a chromatografią Kolumnową?

Papier vs cienkowarstwowa vs chromatografia Kolumnowa
chromatografia papierowa	chromatografia papierowa jest techniką chromatograficzną stosowaną do oddzielania związków w oparciu o adsorpcję ciecz-ciecz i rozpuszczalność związku. Wykorzystuje papier celulozowy jako fazę stacjonarną.
chromatografia cienkowarstwowa	chromatografia cienkowarstwowa jest inną techniką chromatograficzną opartą na adsorpcji cząsteczek w stanie stałym i ciekłym. Ma fazę stacjonarną wykonaną z tlenku glinu lub żelu krzemionkowego i rozpuszczalnika jako fazy ruchomej, która jest rozpuszczalnikiem.
chromatografia Kolumnowa	chromatografia Kolumnowa wykorzystuje kolumnę zapakowaną matrycą, która jest używana do oddzielania cząsteczek głównie na podstawie ich wielkości, powinowactwa lub ładunku.
Faza stacjonarna
chromatografia papierowa	papier wykonany z nitrocelulozy Whatmana jest stosowany jako faza stacjonarna w chromatografii papierowej.
chromatografia cienkowarstwowa	jako fazę stacjonarną chromatografii cienkowarstwowej stosuje się tlenek glinu lub żel krzemionkowy.
chromatografia Kolumnowa	kolumna wypełniona odpowiednim materiałem opakowaniowym jest stosowana jako faza stacjonarna w chromatografii kolumnowej.
Faza ruchoma
chromatografia papierowa	rozpuszczalnikiem bieżącym jest faza ruchoma chromatografii papierowej.
chromatografia cienkowarstwowa	rozpuszczalnikiem bieżącym jest faza ruchoma chromatografii cienkowarstwowej.
chromatografia Kolumnowa	bufor płuczący jest fazą ruchomą chromatografii kolumnowej.
mechanizmy stosowane do separacji
chromatografia papierowa	chromatografia papierowa opiera się na absorpcji ciała stałego i ciekłego.
chromatografia cienkowarstwowa	chromatografia cienkowarstwowa opiera się na absorpcji ciała stałego i ciekłego.
chromatografia Kolumnowa	chromatografia Kolumnowa opiera się na wykluczeniu wielkości, ładunku i kształtu.
Bufor Elucyjny
chromatografia papierowa	niewymagana przez chromatografię papierową.
chromatografia cienkowarstwowa	nie jest wymagana do chromatografii cienkowarstwowej.
chromatografia Kolumnowa	wymagana w chromatografii kolumnowej.
wykrywanie
chromatografia papierowa	barwienie i oznaczanie współczynnika retencji.
chromatografia cienkowarstwowa	barwienie i oznaczanie współczynnika retencji.
chromatografia Kolumnowa	oznaczanie spektrofotometryczne.

podsumowanie-cienka warstwa papieru vs chromatografia Kolumnowa

chromatografia papierowa, TLC i chromatografia kolumnowa są technikami oddzielania stosowanymi do oddzielania biomolekuł, takich jak białka, aminokwasy i węglowodany (głównie monosacharydy). Chromatografia papierowa wykorzystuje papier celulozowy jako fazę stacjonarną, a mechanizm separacji opiera się na adsorpcji ciało stałe-ciecz. TLC wykorzystuje również mechanizmy adsorpcji ciało stałe-ciecz. Cząsteczki są oddzielane w fazie stacjonarnej, w zależności od ich rozpuszczalności w fazie mobilnej. Chromatografia kolumnowa wykorzystuje właściwości fizyczne, takie jak rozmiar, kształt, ładunek i masa cząsteczkowa związku do oddzielenia. Kolumna wypełniona materiałem matrycowym działa jako faza stacjonarna, podczas gdy bufor płuczący działa jako faza rozpuszczalnikowa. Jest to różnica między cienką warstwą papieru a chromatografią kolumnową.

1.Clark, Jim. „CHROMATOGRAFIA CIENKOWARSTWOWA.”Chromatografia Cienkowarstwowa, 2007. Dostępne tutaj
2.Coskun, Ozlem. „Techniki Separacji: Chromatografia.”Northern Clinics of Istanbul, Kare Publishing, 2016. Dostępne tutaj

Zdjęcie dzięki uprzejmości:

1.”Chromatography tank” (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2.”Tlc sequence” by Quantockgoblin, (Public Domain) via Commons Wikimedia
3.”Column chromatography” (Public Domain) via Commons Wikimedia