• Articles
• admin

belangrijk verschil-papier Versus dunne laag Versus kolomchromatografie

Papierchromatografie, dunne laagchromatografie en kolomchromatografie zijn drie soorten chromatografische technieken. Het belangrijkste verschil tussen papierchromatografie, dunne laagchromatografie en kolomchromatografie is gebaseerd op het type stationaire die fase in de chromatografietechniek wordt gebruikt. De papierchromatografie gebruikt een cellulosedocument als zijn stationaire fase, gebruikt de dunne Laagchromatografie alumina of kiezelzuurgel als zijn stationaire fase, terwijl de kolomchromatografie een kolom gebruikt die met een geschikt Matrijsmateriaal als zijn stationaire fase wordt ingepakt.

bij het proces van scheiding en identificatie van biomoleculen zoals eiwitten en koolhydraten is chromatografie een belangrijke biofysische techniek die wordt gebruikt. De chromatografie scheidt samenstellingen die op hun oplosbaarheid, grootte en last worden gebaseerd. Gebaseerd op het scheidingsmechanisme, gebruikt de chromatografie mechanismen zoals ionenuitwisseling, absorptie, verdeling en grootteuitsluiting en er zijn drie chromatografische technieken; namelijk, document, dunne laag, en kolomchromatografie. De papierchromatografie is gebaseerd op de vast-vloeibare adsorptie en oplosbaarheid van de samenstelling, en het gebruikt een cellulosedocument als stationaire fase. De dunne laagchromatografie is gebaseerd op vast-vloeibare adsorptie van molecules. Het heeft een stationaire fase die typisch van aluminiumoxide of kiezelzuurgel en de mobiele fase wordt gemaakt die het oplosmiddel is. De chromatografie van de kolom gebruikt een kolom die met een matrijs wordt ingepakt die aan afzonderlijke molecules wordt gebruikt die hoofdzakelijk op hun grootte, affiniteit of zijn last worden gebaseerd.

inhoud

1. Overzicht van chromatografie en sleutelverschil
2. Wat is Papierchromatografie
3. Dunnelaagchromatografie
4. Wat is kolomchromatografie
5. Overeenkomsten tussen papier -, dunne laag-en kolomchromatografie
6. Naast elkaar vergelijken-papier vs dunne laag vs kolomchromatografie in tabelvorm
7. Samenvatting

Wat is Papierchromatografie?

Papierchromatografie is het eenvoudigste type chromatografie dat wordt gebruikt en wordt niet gebruikt voor uitgebreid onderzoek. Het wordt hoofdzakelijk gebruikt in studentenlaboratoria om biomoleculen zoals aminozuren en koolhydraten huidig in mengsels te identificeren. De papierchromatografie gebruikt een stationaire fase die gebruikend cellulosepapier of Whatman-filtreerpapier en een mobiele fase wordt gemaakt die gewoonlijk gebruikend organische oplosmiddelen zoals n-butanol, enz. wordt voorbereid. De stationaire fase is verzadigd met water, waardoor de stationaire fase vloeibaar wordt. Aldus, wanneer de samenstellingen worden gespot en om in aanwezigheid van de mobiele fase, afhankelijk van de oplosbaarheid van de samenstellingen worden toegestaan in werking te stellen, worden zij gescheiden. Aldus, op de ontwikkeling van het chromatogram, kan het bevlekken worden gedaan om de looppas de lengte van elke samenstelling te bepalen. Hierdoor kan de retentiefactor worden berekend.

Papierchromatografie kan verder worden ingedeeld als oplopende papierchromatografie en dalende papierchromatografie, afhankelijk van de richting van het lopende oplosmiddel.

Wat is dunnelaagchromatografie?

dunnelaagchromatografie of TLC is een algemeen gebruikte techniek om verschillende aminozuren huidig in een mengsel te identificeren of voor de identificatie van proteã nen. De techniek van scheiding is gebaseerd op de vast-vloeibare adsorptie. Tijdens dunne laagchromatografie, wordt een plaat gemaakt van aluminiumoxide of kiezelzuurgel gebruikt als stationaire fase. Het oplosmiddelmengsel varieert afhankelijk van de behoefte en kan verschillende combinaties van organische verbindingen zoals n-butanol, azijnzuur en water gebruiken om het oplosmiddel te bereiden. De te scheiden verbindingen worden op de plaat Gespot en in het oplosmiddelmengsel ondergedompeld. Zodra het oplosmiddel reist omhoog gebaseerd op de capillaire actie die door de plaat wordt gegeven, beweegt de samenstellingen die op de plaat worden Gespot ook afhankelijk van hun oplosbaarheid in het oplosmiddel.

de detectie van de vlekken nadat het chromatogram is uitgevoerd met behulp van verschillende kleuringprocedures. Sommigen gebruiken ninhydrinekleuring die vrij een giftige methode van kleuring is. Moderne dunne laagchromatogrammen gebruiken fluorescentietechnieken om het chromatogram na de looppas te bekijken. Afhankelijk van de afstanden die het heeft afgelegd, kan de retentietijd van elke verbinding worden berekend. Dit kan worden gebruikt om het type van verbinding te identificeren gescheiden op basis van het gebruikte mengsel. TLC wordt hoofdzakelijk gebruikt om aminozuren in een eiwitmengsel te identificeren en ook om verschillende types van monosaccharides huidig in een mengsel te scheiden.

Wat is kolomchromatografie?

kolomchromatografie is een brede term die wordt gebruikt om vele soorten chromatografietechnieken te beschrijven die de kolom gebaseerde scheidingsmethode gebruiken. In kolomchromatografie, wordt een fysieke kolom gebruikt met een verpakkingsmateriaal om de samenstellingen te scheiden. De scheiding kan worden gebaseerd op verschillende fysische eigenschappen die door de verbindingen worden tentoongesteld. Deze eigenschappen kunnen de lading, grootte, 3D-bouw en bindende capaciteit, enz. zijn. Aldus, doet de kolom die met het Matrijsmateriaal wordt ingepakt dienst als stationaire fase en doet de wasbuffer die op de kolom wordt toegepast dienst als mobiele fase.

als de moleculen worden gescheiden op basis van de grootte, wordt het verpakkingsmateriaal zodanig verpakt dat het poriën achterlaat waar de verbindingen doorheen kunnen. Aldus, worden de grotere molecules die niet door de poriën kunnen stromen eerst uitgewist, terwijl de kleinere molecules veel langere tijd vergen om uit te elueren.

indien de moleculen worden gescheiden op basis van hun lading, zal de stationaire fase een anion-of kationenwisselaar bevatten waaraan de verbindingen worden aangetrokken op basis van hun lading. Dus tijdens de wastap worden de niet-gebonden verbindingen geëlueerd. Bij het toevoegen van de elutiebuffer worden de gebonden geladen verbindingen geëlueerd. De detectie van deze eluenten is meestal gebaseerd op spectrofotometrische technieken.

Wat zijn de overeenkomsten tussen Papierdunne laag en kolomchromatografie?

• alle Papierdunne laag – en kolomchromatografie drie technieken worden gebruikt voor de scheiding van biomoleculen zoals aminozuren, eiwitten en koolhydraten.Papierdunne Chromatografietechnieken met laag-en kolomchromatografie hebben een mobiele fase en een stationaire fase.
• Papierdunne Chromatografietechnieken voor laag-en kolomchromatografie maken gebruik van biofysische mechanismen voor scheiding.

Wat is het verschil tussen Papierdunne laag-en kolomchromatografie?

papier vs dunne laag vs kolomchromatografie
Papierchromatografie	Papierchromatografie is een chromatografische techniek die wordt gebruikt om verbindingen te scheiden op basis van de vloeistof-vloeistofadsorptie en de oplosbaarheid van de verbinding. Het gebruikt cellulosepapier als stationaire fase.
dunne Laagchromatografie	dunne laagchromatografie is een andere chromatografische techniek die gebaseerd is op adsorptie van vaste en vloeibare moleculen. Het heeft een stationaire die fase van aluminiumoxide of kiezelzuurgel wordt gemaakt en een oplosmiddel als mobiele fase, die het oplosmiddel is.
kolom chromatografie	kolom chromatografie gebruikt een kolom verpakt met een matrix die wordt gebruikt om moleculen te scheiden die hoofdzakelijk op hun grootte, affiniteit of zijn lading worden gebaseerd.
stationaire fase
Papierchromatografie	papier gemaakt van nitrocellulose van Whatman wordt gebruikt als de stationaire fase in papierchromatografie.
dunne Laagchromatografie	aluminiumoxide of silicagel wordt gebruikt als de stationaire fase van de dunne laagchromatografie.
kolom chromatografie	een kolom verpakt met geschikt verpakkingsmateriaal wordt gebruikt als de stationaire fase in de kolom chromatografie.
mobiele fase
Papierchromatografie	Lopend oplosmiddel is de mobiele fase van de papierchromatografie.
dunnelaagchromatografie	Lopend oplosmiddel is de mobiele fase van de dunnelaagchromatografie.
kolom chromatografie	Wasbuffer is de mobiele fase van de kolomchromatografie.
voor scheiding gebruikte mechanismen
Papierchromatografie	Papierchromatografie is gebaseerd op absorptie van vaste en vloeibare stoffen.
dunne Laagchromatografie	dunne laagchromatografie is gebaseerd op absorptie van vaste en vloeibare stoffen.
kolom chromatografie	kolom chromatografie is gebaseerd op grootte uitsluiting, lading en vorm.
elutie-Buffer
Papierchromatografie	niet vereist voor papierchromatografie.
dunnelaagchromatografie	niet vereist voor dunnelaagchromatografie.
kolom chromatografie	vereist voor kolom chromatografie.
detectie
Papierchromatografie	kleuring en door bepaling van de Retentiefactor.
dunnelaagchromatografie	kleuring en door bepaling van de Retentiefactor.
kolom chromatografie	spectrofotometrische bepaling.

samenvatting-Papierdunne laag vs kolomchromatografie

Papierchromatografie, TLC en kolomchromatografie zijn scheidingstechnieken die worden gebruikt om biomoleculen zoals eiwitten, aminozuren en koolhydraten (voornamelijk monosachariden) te scheiden. De papierchromatografie gebruikt een cellulosedocument als stationaire fase, en het mechanisme van scheiding is gebaseerd op vast-vloeibare adsorptie. TLC maakt ook gebruik van vast-vloeibaar adsorptiemechanismen. De molecules worden gescheiden op de stationaire fase, afhankelijk van hun oplosbaarheid in de mobiele fase. De kolomchromatografie gebruikt fysische eigenschappen zoals grootte, vorm, last en het molecuulgewicht van de te scheiden samenstelling. De kolom die met het Matrijsmateriaal wordt ingepakt doet dienst als stationaire fase, terwijl de wasbuffer als oplosmiddelfase dienst doet. Dit is het verschil tussen een papier dunne laag en kolomchromatografie.

referentie:

1.Clark, Jim. “THIN LAYER CHROMATOGRAPHY.”Thin Layer Chromatography, 2007. Hier beschikbaar
2.Coskun, Ozlem. “Separation Techniques: Chromatography.”Northern Clinics of Istanbul, Kare Publishing, 2016. Hier beschikbaar

figuur met dank aan:

1.’Chromatography tank’ (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2.’TLC sequence’ van Quantockgoblin, (Public Domain) via Commons Wikimedia
3.’Kolomchromatografie’ (publiek domein) via Commons Wikimedia