紙薄層とカラムクロマトグラフィーの違い
主な違い–紙vs薄層vsカラムクロマトグラフィー
紙クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、カラムクロマトグラフィーは、三つのタイプのクロマトグラフィー技術である。 紙クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、カラムクロマトグラフィーの主な違いは、クロマトグラフィー技術で使用される固定相の種類に基づ ペーパークロマトグラフィーはセルロース紙を静止相として使用し、薄層クロマトグラフィーはアルミナまたはシリカゲルを静止相として使用するのに対し、カラムクロマトグラフィーは適切なマトリックス材料を充填したカラムを静止相として使用する。
タンパク質や炭水化物などの生体分子の分離と同定の過程で、クロマトグラフィーは重要な生物物理学的手法として使用されています。 クロマトグラフィーは、その溶解度、サイズおよび電荷に基づいて化合物を分離する。 分離機構に基づいて,クロマトグラフィーはイオン交換,吸収,分配,サイズ排除などの機構を用い,紙,薄層,カラムクロマトグラフィーの三つのクロマトグラフィー技術がある。 紙クロマトグラフィーは、化合物の固液吸着および溶解性に基づいており、固定相としてセルロース紙を使用する。 薄層クロマトグラフィーは、分子の固液吸着に基づいています。 これは、典型的にはアルミナまたはシリカゲルで作られた固定相および溶媒である移動相を有する。 カラムクロマトグラフィーは、主にそのサイズ、親和性またはその電荷に基づいて分子を分離するために使用されるマトリックスを充填したカラム
1. クロマトグラフィーの概要と主要な違い
2. ペーパークロマトグラフィーとは
3. 薄層クロマトグラフィーとは
4. カラムクロマトグラフィーとは
5. 紙、薄層およびカラムクロマトグラフィーの類似性
6。 サイドバイサイド比較-紙vs薄層vsカラムクロマトグラフィー表形式
7. 概要
紙クロマトグラフィーとは何ですか?
紙クロマトグラフィーは、使用されるクロマトグラフィーの最も単純なタイプであり、広範な研究には使用されていません。 学生の実験室で主に混合物で現在のアミノ酸および炭水化物のような生体分子を識別することを使用します。 ペーパークロマトグラフィーは、セルロース紙またはワットマン濾紙を用いて製造される固定相と、通常、n-ブタノールなどの有機溶媒を用いて調製される移動相を使用する。 静止相は水で飽和し、静止相を液体にする。 したがって、化合物が発見され、化合物の溶解度に依存して移動相の存在下で走行することが許されると、それらは分離される。 したがって、クロマトグラムの開発時に、各化合物の実行長を決定するために染色を行うことができる。 これにより、保持係数を計算することができる。
図01: 紙クロマトグラフィー
紙クロマトグラフィーは、実行溶媒の方向に応じて、昇順紙クロマトグラフィーと降順紙クロマトグラフィーにさらに分類できます。
薄層クロマトグラフィーとは何ですか?
薄層クロマトグラフィーまたはTLCは、混合物中に存在する異なるアミノ酸を同定したり、タンパク質を同定するために一般的に使用される技術です。 分離の技術は固液吸着に基づいています。 薄層クロマトグラフィーの間に、アルミナかケイ酸ゲルから成っている版は静止した段階として使用されます。 溶媒混合物は、必要に応じて変化し、溶媒を調製するために、n−ブタノール、酢酸、および水のような有機化合物の異なる組み合わせを使用してもよい。 分離されるべき化合物は、プレート上に斑点を付けられ、溶媒混合物中に浸漬される。 溶媒が版によって与えられる毛管行為に基づいて移動すれば、版で斑点を付けられた混合物はまた溶媒の容解性によって動きます。
図02: 薄層クロマトグラフィー
クロマトグラムを実行した後のスポットの検出は、異なる染色手順によって行われます。 いくつかは、かなり染色の毒性の方法であるニンヒドリン染色を使用します。 現代薄層のクロマトグラムは操業の後でクロマトグラムを見るのに蛍光性の技術を使用する。 それが移動した距離に応じて、各化合物の保持時間を計算することができる。 これは、使用される混合物に基づいて分離される化合物のタイプを識別するために使用することができる。 TLCは、主にタンパク質混合物中のアミノ酸を同定し、混合物中に存在する異なるタイプの単糖を分離するためにも使用される。
カラムクロマトグラフィーとは?
カラムクロマトグラフィーは、カラムベースの分離方法を使用する多くの種類のクロマトグラフィー技術を記述するために使用される広義の用語です。 カラムクロマトグラフィーでは、物理カラムを充填材料と共に使用して化合物を分離する。 分離は、化合物によって示される異なる物理的特性に基づくことができる。 これらの特性は、電荷、サイズ、3D立体配座および結合能力などであり得る。 したがって、マトリックス材料で充填されたカラムは固定相として作用し、カラムに塗布された洗浄緩衝液は移動相として作用する。
サイズに基づいて分子が分離されている場合、充填材は化合物が通過するための孔を残すように充填されます。 したがって、細孔を流れることができないより大きな分子は最初に溶出されるが、より小さな分子は溶出するのにはるかに長い時間がかかる。
図03:カラムクロマトグラフィー
分子が電荷に基づいて分離されている場合、固定相にはアニオンまたは陽イオン交換体が含まれ、その電荷に基づいて化合物が引き付けられる。 従って、洗浄工程の間に、非結合化合物が溶出される。 溶出緩衝液を添加すると、結合した荷電化合物が溶出される。 これらの溶離液の検出は、主に分光光度法に基づいています。
紙薄層とカラムクロマトグラフィーの類似点は何ですか?
- すべての紙薄層およびカラムクロマトグラフィーアミノ酸、タンパク質、炭水化物などの生体分子の分離には、三つの技術が使用されています。
- 紙薄層およびカラムクロマトグラフィー技術は、移動相および静止相を有する。
- 紙薄層およびカラムクロマトグラフィー技術は、分離のために生物物理学的機構を使用する。
紙薄層とカラムクロマトグラフィーの違いは何ですか?
紙vs薄層vsカラムクロマトグラフィー |
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ペーパークロマトグラフィー | ペーパークロマトグラフィーは混合物の液体液体吸着そして容解性に基づいて混合物を分けるのに使用するクロマトグラフィーの技 それは静止した段階としてセルロースのペーパーを使用する。 |
薄層クロマトグラフィー | 薄層クロマトグラフィーは、分子の固液吸着に基づく別のクロマトグラフィー技術です。 これは、アルミナまたはシリカゲルからなる固定相と、溶媒である移動相としての溶媒を有する。 |
カラムクロマトグラフィー | カラムクロマトグラフィーは、主にそのサイズ、親和性またはその電荷に基づいて分子を分離するために使用されるマト |
定位相 | |
紙クロマトグラフィー | Whatmanのニトロセルロースからなる紙は、紙クロマトグラフィーの静止相として使用されます。 |
薄層クロマトグラフィー | アルミナまたはシリカゲルは、薄層クロマトグラフィーの静止相として使用される。 |
カラムクロマトグラフィー | カラムクロマトグラフィーの固定相として、適切な梱包材を充填したカラムを使用します。 |
移動相 | |
紙クロマトグラフィー | 実行溶媒は、紙クロマトグラフィーの移動相である。 |
薄層クロマトグラフィー | 実行溶媒は、薄層クロマトグラフィーの移動相である。 |
カラムクロマトグラフィー | 洗浄緩衝液はカラムクロマトグラフィーの移動相である。 |
分離のために使用されるメカニズム | |
紙クロマトグラフィー | 紙クロマトグラフィーは固液吸収に基づいています。 |
薄層クロマトグラフィー | 薄層クロマトグラフィーは固液吸収に基づいています。 |
カラムクロマトグラフィー | カラムクロマトグラフィーは、サイズ排除、電荷および形状に基づいています。 |
溶出緩衝液 | |
紙クロマトグラフィー | 紙クロマトグラフィーでは必要ありません。 |
薄層クロマトグラフィー | 薄層クロマトグラフィーには必要ありません。 |
カラムクロマトグラフィー | カラムクロマトグラフィーに必要です。 |
検出 | |
紙クロマトグラフィー | 染色および保持因子を決定することにより。 |
薄層クロマトグラフィー | 染色および保持因子を決定することにより。 |
カラムクロマトグラフィー | 分光光度測定。 |
概要-紙薄層vsカラムクロマトグラフィー
紙クロマトグラフィー、TLC、カラムクロマトグラフィーは、タンパク質、アミノ酸、炭水化物(主に単糖類)などの生体分子を分離するために使用される分離技術である。 ペーパークロマトグラフィーは、固定相としてセルロース紙を使用し、分離のメカニズムは固液吸着に基づいています。 TLCはまた、固液吸着機構を使用しています。 分子は、移動相におけるそれらの溶解度に依存して、固定相上で分離される。 カラムクロマトグラフィーは、化合物のサイズ、形状、電荷および分子量などの物理的性質を使用して分離する。 マトリックス材料で充填されたカラムは固定相として作用し、洗浄緩衝液は溶媒相として作用する。 これは、紙の薄層とカラムクロマトグラフィーの違いです。
参照:
1.クラークジム “薄層クロマトグラフィー。”薄層クロマトグラフィー、2007。 ここで利用可能
2.コスくんオズレム “分離技術:クロマトグラフィー。”イスタンブールの北部診療所、カレ出版、2016。 画像提供:
画像提供:
1.’クロマトグラフィータンク'(CC BY-SA3.0)Via Commons Wikimedia
2.’Tlcシーケンス’By Quantockgoblin,(パブリックドメイン)Via Commons Wikimedia
3.’カラムクロマトグラフィー'(パブリックドメイン)Via Commons Wikimedia