• Articles
• admin

kulcskülönbség – papír vs vékony réteg vs Oszlopkromatográfia

a Papírkromatográfia, a vékonyréteg-kromatográfia és az oszlopkromatográfia háromféle kromatográfiás technika. A papírkromatográfia, a vékonyréteg-kromatográfia és az oszlopkromatográfia közötti fő különbség a kromatográfiás technikában alkalmazott állófázis típusától függ. A papírkromatográfia állófázisként cellulózpapírt használ, a vékonyréteg-kromatográfia állófázisként alumínium-oxidot vagy szilikagélt használ, míg az Oszlopkromatográfia állófázisként megfelelő mátrixanyaggal töltött oszlopot használ.

a biomolekulák, például fehérjék és szénhidrátok szétválasztásának és azonosításának folyamatában a kromatográfia fontos biofizikai technika. A kromatográfia elválasztja a vegyületeket oldhatóságuk, méretük és töltésük alapján. Az elválasztási mechanizmus alapján a kromatográfia olyan mechanizmusokat használ, mint az ioncsere, az abszorpció, a partíció és a méret kizárása, és három kromatográfiás technika létezik; nevezetesen papír, vékonyréteg és oszlopkromatográfia. A papírkromatográfia a vegyület szilárd-folyadék adszorpcióján és oldhatóságán alapul, és állófázisként cellulózpapírt használ. A vékonyréteg-kromatográfia a molekulák szilárd-folyékony adszorpcióján alapul. Állófázisa van, amely jellemzően alumínium-oxidból vagy szilikagélből készül, valamint a mobil fázis, amely az oldószer. Az oszlopkromatográfia mátrixba csomagolt oszlopot használ, amelyet a molekulák elválasztására használnak, elsősorban méretük, affinitásuk vagy töltésük alapján.

tartalom

1. A kromatográfia és a kulcskülönbség áttekintése
2. Mi a Papírkromatográfia
3. Mi a vékonyréteg-kromatográfia
4. Mi az Oszlopkromatográfia
5. Hasonlóságok a papír, a vékonyréteg és az Oszlopkromatográfia között
6. Egymás melletti összehasonlítás-papír vs vékony réteg vs Oszlopkromatográfia táblázatos formában
7. Összefoglaló

mi a Papírkromatográfia?

a Papírkromatográfia az alkalmazott kromatográfia legegyszerűbb típusa, és nem használják kiterjedt kutatásokhoz. Főleg diáklaboratóriumokban használják a keverékekben jelen lévő biomolekulák, például aminosavak és szénhidrátok azonosítására. A papírkromatográfia állófázist használ, amelyet cellulózpapír vagy Whatman szűrőpapír felhasználásával készítenek, valamint egy mobil fázist, amelyet általában szerves oldószerek, például n-butanol stb. Az állófázis vízzel telített, így az állófázis folyékony. Így, amikor a vegyületeket a mozgó fázis jelenlétében észleljük és hagyjuk futni, a vegyületek oldhatóságától függően, elválasztjuk őket. Így a kromatogram kifejlesztése után festéssel meg lehet határozni a futás az egyes vegyületek hossza. A retenciós tényező így kiszámítható.

a papírkromatográfiát tovább lehet besorolni növekvő papírkromatográfiának és csökkenő papírkromatográfiának a futó oldószer irányától függően.

mi a vékonyréteg-kromatográfia?

a vékonyréteg-kromatográfia vagy a TLC általánosan használt technika a keverékben jelen lévő különböző aminosavak azonosítására vagy a fehérjék azonosítására. Az elválasztás technikája a szilárd-folyékony adszorpción alapul. A vékonyréteg-kromatográfia során állófázisként alumínium-oxidból vagy szilikagélből készült lemezt használunk. Az oldószerkeverék igény szerint változik, és az oldószer elkészítéséhez szerves vegyületek, például n-butanol, ecetsav és víz különböző kombinációit használhatja. Az elválasztandó vegyületeket a tányéron pettyezzük, majd az oldószerkeverékbe merítjük. Amint az oldószer felfelé halad a lemez által adott kapilláris hatás alapján, a lemezen foltos vegyületek az oldószerben való oldhatóságuktól függően is mozognak.

a foltok kimutatása a kromatogram után különböző festési eljárásokkal történik. Egyesek ninhidrin festést használnak, amely meglehetősen mérgező festési módszer. A Modern vékonyréteg-kromatogramok fluoreszcencia technikákat alkalmaznak a kromatogram megtekintésére a futás után. A megtett távolságoktól függően kiszámítható az egyes vegyületek retenciós ideje. Ez felhasználható az alkalmazott keverék alapján elválasztott vegyület típusának azonosítására. A TLC-t elsősorban a fehérjekeverékben lévő aminosavak azonosítására, valamint a keverékben jelen lévő különböző típusú monoszacharidok elválasztására használják.

mi az Oszlopkromatográfia?

az Oszlopkromatográfia egy tág kifejezés, amelyet sokféle kromatográfiás technika leírására használnak, amelyek az oszlop alapú elválasztási módszert alkalmazzák. Az oszlopkromatográfiában egy fizikai oszlopot használnak csomagolóanyaggal a vegyületek elválasztására. Az elválasztás a vegyületek által mutatott különböző fizikai tulajdonságokon alapulhat. Ezek a tulajdonságok lehetnek a töltés, a méret, a 3D konformáció és a kötési kapacitás stb. Így a mátrixanyaggal megrakott oszlop állófázisként, az oszlopra felvitt mosópuffer pedig mozgófázisként működik.

ha a molekulákat a méret alapján elválasztjuk, akkor a csomagolóanyagot úgy csomagoljuk, hogy pórusokat hagyjon a vegyületek áthaladásához. Így a nagyobb molekulák, amelyek nem tudnak átfolyni a pórusokon, először eluálódnak, míg a kisebb molekulák eluálása sokkal hosszabb időt vesz igénybe.

ha a molekulákat töltésük alapján választják el egymástól, az állófázisban anion vagy kationcserélő található, amelyhez a vegyületek töltésük alapján vonzódnak. Így a mosási lépés során a nem kötött vegyületek eluálódnak. Az elúciós puffer hozzáadása után a kötött töltött vegyületek eluálódnak. Ezen eluensek kimutatása többnyire spektrofotometriás technikákon alapul.

mi a hasonlóság a papírvékony réteg és az Oszlopkromatográfia között?

• minden papírvékony réteg és Oszlopkromatográfia három technikát alkalmaznak a biomolekulák, például aminosavak, fehérjék és szénhidrátok elválasztására.
• a papírvékony réteg-és Oszlopkromatográfiás technikáknak van egy mozgófázisuk és egy állófázisuk.
• a papírvékony réteg-és Oszlopkromatográfiás technikák biofizikai mechanizmusokat alkalmaznak az elválasztáshoz.

mi a különbség a papírvékony réteg és az Oszlopkromatográfia között?

papír vs vékony réteg vs Oszlopkromatográfia
Papírkromatográfia	a Papírkromatográfia egy kromatográfiás technika, amelyet a vegyületek folyadék-folyadék adszorpciója és oldhatósága alapján történő elválasztására használnak. Állófázisként cellulózpapírt használ.
vékonyréteg-kromatográfia	a vékonyréteg-kromatográfia egy másik kromatográfiás technika, amely molekulák szilárd-folyékony adszorpcióján alapul. Állófázisa alumínium-oxidból vagy szilikagélből készül, mobil fázisként oldószert tartalmaz, amely az oldószer.
Oszlopkromatográfia	az Oszlopkromatográfia egy mátrixba csomagolt oszlopot használ, amelyet a molekulák elválasztására használnak, elsősorban méretük, affinitásuk vagy töltésük alapján.
állófázis
Papírkromatográfia	Whatman nitrocellulózból készült papírt használnak állófázisként a papírkromatográfiában.
vékonyréteg-kromatográfia	alumínium-oxidot vagy szilikagélt használunk a vékonyréteg-kromatográfia állófázisaként.
Oszlopkromatográfia	az oszlopkromatográfiában állófázisként megfelelő csomagolóanyaggal csomagolt oszlopot használunk.
mobil fázis
Papírkromatográfia	a futó oldószer a papírkromatográfia mozgó fázisa.
vékonyréteg-kromatográfia	a futó oldószer a vékonyréteg-kromatográfia mozgó fázisa.
Oszlopkromatográfia	Mosópuffer az oszlopkromatográfia mozgó fázisa.
az elválasztáshoz használt mechanizmusok
Papírkromatográfia	a Papírkromatográfia szilárd-folyadék abszorpción alapul.
vékonyréteg-kromatográfia	a vékonyréteg-kromatográfia szilárd-folyadék abszorpción alapul.
Oszlopkromatográfia	az Oszlopkromatográfia a méret kizárásán, a töltésen és az alakon alapul.
elúciós puffer
Papírkromatográfia	papírkromatográfia Nem szükséges.
vékonyréteg-kromatográfia	vékonyréteg-kromatográfiához Nem szükséges.
Oszlopkromatográfia	oszlopkromatográfia szükséges.
kimutatás
Papírkromatográfia	festéssel és a retenciós tényező meghatározásával.
vékonyréteg-kromatográfia	festéssel és a retenciós tényező meghatározásával.
Oszlopkromatográfia	spektrofotometriás meghatározás.

összefoglaló – papírvékony réteg vs Oszlopkromatográfia

a Papírkromatográfia, a TLC és az oszlopkromatográfia olyan elválasztási technikák, amelyeket biomolekulák, például fehérjék, aminosavak és szénhidrátok (főleg monoszacharidok) elválasztására használnak. A papírkromatográfia állófázisként cellulózpapírt használ, az elválasztás mechanizmusa szilárd-folyadék adszorpción alapul. A TLC szilárd-folyadék adszorpciós mechanizmusokat is alkalmaz. A molekulákat az állófázison elválasztjuk, attól függően, hogy oldhatóak-e a mobil fázisban. Az oszlopkromatográfia olyan fizikai tulajdonságokat használ, mint a méret, az alak, a töltés és a vegyület molekulatömege. A mátrix anyaggal töltött oszlop állófázisként, míg a mosópuffer oldószerfázisként működik. Ez a különbség a papírvékony réteg és az oszlopkromatográfia között.

hivatkozás:

1.Clark, Jim. “VÉKONY RÉTEG KROMATOGRÁFIA.”Vékonyréteg-Kromatográfia, 2007. Elérhető itt
2.Coskun, Ozlem. “Elválasztási Technikák: Kromatográfia.”Isztambul északi klinikái, Kare Publishing, 2016. Elérhető itt

Kép jóvoltából:

1.’Kromatográfiás tartály’ (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2.’Tlc sequence’ a Quantockgoblin által, (Public Domain) via Commons Wikimedia
3.’Oszlopkromatográfia’ (Public Domain) via Commons Wikimedia