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Différence clé – Papier vs Chromatographie sur Couche mince vs Chromatographie sur Colonne

La chromatographie sur papier, la chromatographie sur couche mince et la chromatographie sur colonne sont trois types de techniques chromatographiques. La principale différence entre la chromatographie sur papier, la chromatographie sur couche mince et la chromatographie sur colonne est basée sur le type de phase stationnaire utilisée dans la technique de chromatographie. La chromatographie sur papier utilise un papier de cellulose comme phase stationnaire, la chromatographie sur couche mince utilise de l’alumine ou du gel de silice comme phase stationnaire, tandis que la chromatographie sur colonne utilise une colonne remplie d’un matériau matriciel approprié comme phase stationnaire.

Dans le processus de séparation et d’identification de biomolécules telles que les protéines et les glucides, la chromatographie est une technique biophysique importante utilisée. La chromatographie sépare les composés en fonction de leur solubilité, de leur taille et de leur charge. Sur la base du mécanisme de séparation, la chromatographie utilise des mécanismes tels que l’échange d’ions, l’absorption, la partition et l’exclusion de taille et il existe trois techniques chromatographiques; à savoir la chromatographie sur papier, sur couche mince et sur colonne. La chromatographie sur papier est basée sur l’adsorption solide-liquide et la solubilité du composé, et elle utilise un papier de cellulose comme phase stationnaire. La chromatographie sur couche mince est basée sur l’adsorption solide-liquide de molécules. Il présente une phase stationnaire typiquement constituée d’alumine ou de gel de silice et la phase mobile qui est le solvant. La chromatographie sur colonne utilise une colonne remplie d’une matrice qui est utilisée pour séparer les molécules principalement en fonction de leur taille, de leur affinité ou de leur charge.

CONTENU

1. Aperçu de la chromatographie et de la Différence clé
2. Qu’est-ce que la chromatographie sur papier
3. Qu’est-ce que la chromatographie sur couche mince
4. Qu’est-ce que la chromatographie sur colonne
5. Similitudes Entre la Chromatographie sur Papier, sur Couche Mince et sur Colonne
6. Comparaison côte à Côte – Chromatographie sur Papier par rapport à la Chromatographie sur Couche Mince par rapport à la Chromatographie sur Colonne sous Forme Tabulaire
7. Résumé

Qu’est-ce que la chromatographie sur papier?

La chromatographie sur papier est le type de chromatographie le plus simple utilisé, et elle n’est pas utilisée pour des recherches approfondies. Il est principalement utilisé dans les laboratoires d’étudiants pour identifier des biomolécules telles que les acides aminés et les glucides présents dans les mélanges. La chromatographie sur papier utilise une phase stationnaire réalisée à l’aide de papier cellulosique ou de papier filtre Whatman et une phase mobile généralement préparée à l’aide de solvants organiques tels que le n-butanol, etc. La phase stationnaire est saturée d’eau, ce qui rend la phase stationnaire liquide. Ainsi, lorsque les composés sont repérés et laissés courir en présence de la phase mobile, en fonction de la solubilité des composés, ils sont séparés. Ainsi, lors du développement du chromatogramme, une coloration peut être effectuée pour déterminer la longueur de course de chaque composé. Le facteur de rétention peut ainsi être calculé.

La chromatographie sur papier peut être classée en tant que chromatographie sur papier ascendante et chromatographie sur papier descendante en fonction de la direction du solvant en cours d’exécution.

Qu’est-ce que la chromatographie sur couche mince?

La chromatographie sur couche mince ou CCM est une technique couramment utilisée pour identifier différents acides aminés présents dans un mélange ou pour l’identification de protéines. La technique de séparation est basée sur l’adsorption solide-liquide. Lors de la chromatographie sur couche mince, une plaque en alumine ou en gel de silice est utilisée comme phase stationnaire. Le mélange de solvants varie selon les besoins et peut utiliser différentes combinaisons de composés organiques tels que le n-butanol, l’acide acétique et l’eau pour préparer le solvant. Les composés à séparer sont repérés sur la plaque et immergés dans le mélange de solvants. Une fois que le solvant remonte en fonction de l’action capillaire donnée par la plaque, les composés repérés sur la plaque se déplacent également en fonction de leur solubilité dans le solvant.

La détection des taches après le chromatogramme est effectuée par différentes procédures de coloration. Certains utilisent la coloration à la ninhydrine qui est une méthode de coloration assez toxique. Les chromatogrammes modernes en couche mince utilisent des techniques de fluorescence pour visualiser le chromatogramme après la course. En fonction des distances parcourues, le temps de rétention de chaque composé peut être calculé. Ceci peut être utilisé pour identifier le type de composé séparé en fonction du mélange utilisé. La CCM est principalement utilisée pour identifier les acides aminés dans un mélange de protéines et également pour séparer différents types de monosaccharides présents dans un mélange.

Qu’est-ce que la chromatographie sur colonne?

La chromatographie sur colonne est un terme général utilisé pour décrire de nombreux types de techniques de chromatographie qui utilisent la méthode de séparation basée sur la colonne. En chromatographie sur colonne, une colonne physique est utilisée avec un matériau d’emballage pour séparer les composés. La séparation peut être basée sur différentes propriétés physiques exposées par les composés. Ces propriétés peuvent être la charge, la taille, la conformation 3D et la capacité de liaison, etc. Ainsi, la colonne garnie du matériau matriciel joue le rôle de phase stationnaire et le tampon de lavage appliqué sur la colonne joue le rôle de phase mobile.

Si les molécules sont séparées en fonction de la taille, le matériau d’emballage est emballé de manière à laisser des pores pour que les composés puissent traverser. Ainsi, les molécules plus grosses qui ne peuvent pas s’écouler à travers les pores sont éluées en premier, alors que les molécules plus petites prennent beaucoup plus de temps à éluer.

Si les molécules sont séparées en fonction de leur charge, la phase stationnaire contiendra soit un échangeur d’anions ou de cations vers lequel les composés seront attirés en fonction de leur charge. Ainsi lors de l’étape de lavage, les composés non liés seront élués. Lors de l’ajout du tampon d’élution, les composés chargés liés seront élués. La détection de ces éluants est principalement basée sur des techniques spectrophotométriques.

Quelles sont les Similitudes Entre la Chromatographie sur Couche Mince de Papier et la Chromatographie sur Colonne?

• Tout Papier Chromatographie sur couche mince et sur colonne trois techniques sont utilisées pour la séparation de biomolécules telles que les acides aminés, les protéines et les glucides.
• Les techniques de chromatographie sur couche mince et sur colonne de papier ont une phase mobile et une phase stationnaire.
• Les techniques de chromatographie sur couche mince et sur colonne de papier utilisent des mécanismes biophysiques pour la séparation.

Quelle est la Différence Entre la Chromatographie sur Couche Mince de Papier et la Chromatographie sur Colonne?

Chromatographie sur Papier vs Couche Mince vs Colonne
Chromatographie sur papier	La chromatographie sur papier est une technique chromatographique utilisée pour séparer les composés en fonction de l’adsorption liquide-liquide et de la solubilité du composé. Il utilise un papier de cellulose comme phase stationnaire.
La chromatographie sur couche mince	La chromatographie sur couche mince est une autre technique chromatographique basée sur l’adsorption solide-liquide de molécules. Il a une phase stationnaire en alumine ou en gel de silice et un solvant comme phase mobile, qui est le solvant.
Chromatographie sur colonne	La chromatographie sur colonne utilise une colonne remplie d’une matrice qui est utilisée pour séparer les molécules principalement en fonction de leur taille, de leur affinité ou de leur charge.
Phase Stationnaire
Chromatographie sur papier	Le papier à base de nitrocellulose de Whatman est utilisé comme phase stationnaire en chromatographie sur papier.
Chromatographie sur couche mince	L’alumine ou le gel de silice est utilisé comme phase stationnaire de la chromatographie sur couche mince.
Chromatographie sur colonne	Une colonne emballée avec un matériau d’emballage approprié est utilisée comme phase stationnaire dans la chromatographie sur colonne.
Phase Mobile
Chromatographie sur papier	Le solvant courant est la phase mobile de la chromatographie sur papier.
Chromatographie sur couche mince	Le solvant courant est la phase mobile de la chromatographie sur couche mince.
Chromatographie sur colonne	Le tampon de lavage est la phase mobile de la chromatographie sur colonne.
Mécanismes utilisés pour la Séparation
Chromatographie sur papier	La chromatographie sur papier est basée sur l’absorption solide-liquide.
Chromatographie sur couche mince	La chromatographie sur couche mince est basée sur l’absorption solide-liquide.
Chromatographie sur colonne	La chromatographie sur colonne est basée sur l’exclusion de taille, la charge et la forme.
Tampon D’Élution
Chromatographie sur papier	Non requise par la chromatographie sur papier.
Chromatographie sur couche mince	Non nécessaire pour la chromatographie sur couche mince.
Chromatographie sur colonne	Requise en chromatographie sur colonne.
Détection
Chromatographie sur papier	Coloration et en déterminant le facteur de rétention.
Chromatographie sur couche mince	Coloration et en déterminant le facteur de rétention.
Chromatographie sur colonne	Détermination spectrophotométrique.

Résumé – Chromatographie sur papier en couche mince par rapport à la chromatographie sur colonne

La chromatographie sur papier, la CCM et la chromatographie sur colonne sont des techniques de séparation utilisées pour séparer des biomolécules telles que des protéines, des acides aminés et des glucides (principalement des monosaccharides). La chromatographie sur papier utilise un papier de cellulose comme phase stationnaire, et le mécanisme de séparation est basé sur l’adsorption solide-liquide. La CCM utilise également des mécanismes d’adsorption solide-liquide. Les molécules sont séparées sur la phase stationnaire, en fonction de leur solubilité dans la phase mobile. La chromatographie sur colonne utilise des propriétés physiques telles que la taille, la forme, la charge et le poids moléculaire du composé à séparer. La colonne emballée avec le matériau matriciel joue le rôle de phase stationnaire, tandis que le tampon de lavage joue le rôle de phase solvant. C’est la différence entre une couche mince de papier et une chromatographie sur colonne.

Référence:

1.Clark, Jim. « CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE. »Chromatographie sur couche mince, 2007. Disponible ici
2.Coskun, Ozlem. « Techniques de séparation : Chromatographie. » Cliniques du Nord d’Istanbul, Éditions Kare, 2016. Disponible ici

Courtoisie de l’image:

1. »Réservoir de chromatographie » (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2.’Séquence Tlc’ par Quantockgoblin, (Domaine public) via Commons Wikimedia
3.’Chromatographie sur colonne’ (Domaine public) via Commons Wikimedia